Vincent Desagnat débute comme animateur radio. C'est sur Fun Radio et Radio Nova qu'il fait la connaissance de son complice Michaël Youn. Ensemble, ils décident d'écrire et d'interpréter des sketchs hauts en couleurs diffusés dans l'émission de télévision Le Morning Live sur M6.
Pour ses débuts au cinéma, il est dirigé par son frère François dans un court-métrage comique et musical. La même année, Edouard Baer lui offre un petit rôle dans son premier long métrage, La Bostella.
Il rejoint ensuite son ami Michaël Youn sur le tournage de La Beuze puis participe au film à sketches Les 11 Commandements largement inspiré de la série télé Jackass.
Le 20 septembre 2006 il est à l'affiche du film de et avec Charlotte de Turckheim, Les aristos et revient en 2008 dans la comédie Les Dents de la Nuit. En 2009, Vincent partage l'affiche avec Elie Semoun dans Cyprien puis donne de la voix dans le dessin animé Lascars pour lequel il incarne le personnage de John Boolman.
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