Elle fait d'abord des études de journalisme puis travaille un peu à la télévision, tout en obtenant de temps en temps des petits rôles au cinéma. Elle a aussi été mannequin pour Lancôme.Isabella Rossellini a été mariée à Martin Scorsese de 1979 à 1983, et a également eu une relation avec David Lynch.Sa véritable carrière au cinéma débute avec le film Nina en 1976. Puis elle a joué dans Blue Velvet en 1986, La mort vous va si bien en 1992, Nos funérailles en 1996, The architect en 2005...En 2008 elle joue dans le film Des trous dans la tête, de Guy Maddin et dans Un mari de trop aux côtés d'Uma Thurman.Paralellement à sa carrière d'actrice, Isabella a aussi écrit et réalisé une série de huit courts métrages, intitulée Green Porno, dans lesquels elle interprète, costumée, divers insectes pour illustrer leurs mœurs sexuelles.
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